1.原理:
二氧化硫(或來自亞硫酸鹽)被四氯汞鈉吸收后,生成穩定的絡合物,再與甲醛和鹽酸副玫瑰苯胺作用,并經分子重排后,生成紫紅色的絡合物。顏色的深淺與二氧化硫的濃度成正比,可以比色測定。
本方法使用于各類食品中游離型和結合型硫酸鹽殘留量的測定。方法操作簡單、快速、靈敏度高,再現性良好。
2.試劑:
(1)5mol/L氫氧化鈉溶液;0.5mol/L硫酸溶液;12g/L氨基磺酸銨溶液。
(2)四氯汞鈉吸收液:稱取13.6g氯化高汞及6g氯化鈉,溶于水中并稀釋至1000m1,放置,過濾后備用。
(3)甲醛溶液:吸取0.55m1無聚合沉淀的36%甲醛,加水99.45ml稀釋,混勻。
(4)淀粉指示液:稱取1g可溶性淀粉,用少量水調成糊狀,緩緩傾入100m1沸水中,隨加隨攪拌,煮沸,放冷備用,此溶液臨用時現配。
(5)亞鐵溶液:稱取10.6g亞鐵 [K Fe(CN) ,·3H 0],加水溶解并稀釋至100m1。
(6)乙酸鋅溶液:稱取22g[Zn(CH COO) ·2H20],溶于少量水中,加入3m1冰乙酸,加水稀釋至100m1。
(7)鹽酸副玫瑰苯胺溶液:稱取0.1gC H N Cl·4H20于研缽中,加少量水研磨使溶解并稀釋至100ml。取出20ml,置于100ml容量瓶中,加鹽酸溶液6mol/L,充分搖勻后使溶液由紅變黃,如不變黃再滴加少量鹽酸至出現黃色,再加水稀釋至刻度,混勻備用(如無鹽酸副玫瑰苯胺可用鹽酸晶紅代替)。
鹽酸副玫瑰苯胺的精制方法:稱取20g鹽酸副玫瑰苯胺于400m1水中,用50ml鹽酸溶液2mol/L酸化,徐徐攪拌,加4—5g活性炭,加熱煮沸2min。將混合物倒入大漏斗抽濾,過濾(用保溫漏斗趁熱過濾)。濾液放置,出現結晶,然后再用布氏漏斗抽濾,將結晶再懸浮于1000ml—乙醇(10:1)的混合物中,振搖3—5min,以布氏漏斗抽濾,再用反復洗滌至醚層不帶色為止。于硫酸干燥器中干燥,研細后儲存于棕色瓶中保存。
(8)0.1mol/L碘溶液。
(9)0.1mol/L硫代硫酸鈉標準滴定溶。
(10)二氧化硫標準儲備溶液:稱取0.5g亞硫酸鈉,溶于200m1四氯汞鈉吸收液中,放置,上清液用定量濾紙過濾備用。
吸取10m1亞硫酸氫鈉—四氯汞鈉溶液于250ml碘量瓶中,加100m1水,準確加水20m1碘溶液和5m1冰乙酸,搖勻,放置暗處2min后,迅速以硫代硫酸鈉標準滴定溶液0.1mol/L滴定至淡黃色。加0.5ml淀粉指示劑,繼續滴至無色。另取100m1水,準確加入20ml碘溶液,加5ml冰乙酸,按同一方法做空白試驗。
計算:C=[(V —V )×C ×32.03]/10
式中:C為二氧化硫標準溶液濃度(mg/m1);C 為硫代硫酸鈉標準滴定溶液的濃度(mol/L);V 為測定用二氧化硫標準溶液消耗硫代硫酸鈉標準滴定溶液體積(m1);V 為試劑空白消耗硫代硫酸鈉標準滴定溶液體積(ml);32.03為與1ml硫代硫酸鈉標準滴定溶液[c(Na S O )=1 mol /L]相當的二氧化硫的質量(mg)。
(11)二氧化硫標準使用溶液:臨用前將二氧化硫儲備溶液以四氯汞鈉吸收液稀釋成每毫升含2ug二氧化硫。
3.儀器:UV-1300型紫外可見分光光度計。
4.操作方法:
(1)樣品處理:水溶性固體樣品如白糖等,可稱取10g均勻樣品(樣品量可視含量高低而定),以少量水溶解,置于100m1容量瓶中,加入4m1 0.5mol/L氫氧化鈉溶液,5min后加入4 m1 0.5mol/L硫酸溶液,然后加入20m1四氯汞鈉吸收液,以水稀釋至刻度。其他固體如餅干、粉絲等,稱取5—10g研磨均勻的樣品,以少量水濕潤并移人100m1容量瓶中,然后加入20ml四氯汞鈉吸收液,浸泡4h以上,若上層溶液不澄清,可加入亞鐵及乙酸鋅溶液各2.5m1,最后用水稀釋至刻度,過濾后備用。